灰树花菌丝体的深层培养过程是怎样的？
将培养液置于500ml三角瓶中，每瓶容量为100ml，加入10 ~ 15个直径小于0.8cm的小玻璃珠或玻璃碎片，用棉塞和牛皮纸密封，121℃灭菌40min，取出冷却至28℃接种。每瓶接种小块倾斜的母种，使气生菌丝一面朝上悬浮在液面上，在24 ~ 26℃恒温下仍培养48小时。当气生菌丝伸入培养液后，置于往复式摇床上振荡培养，振荡频率为80 ~ 100次/分，振幅(行程)为6 ~ 10cm；如果使用转盘，偏心距为4 cm，振荡频率为150 ~ 220 rpm。由于转速较高，菌丝球一般较大，菌丝球表面蓬松菌丝较少，不适合作为菌种使用。因此，一般转盘在使用前应适当调整偏心度。摇床温度控制在24 ~ 26℃，培养时间为72 ~ 96小时。不同种类的食用菌，其摇床培养的技术参数是不同的。灰树花一般在25℃，200转，偏心4厘米。摇瓶3-4天后，培养液呈黄褐色，清澈透明，菌丝球多。显微镜下，菌丝球直径应在1-2 mm内，离心过滤样品(2500 rpm，15 min)，在105℃干燥至恒重，称取菌丝干重至10g/L..此类菌株可再次接种于三角瓶中，每瓶接种10 ml菌液，继续扩大摇瓶培养。由于菌丝球处于旺盛生长状态，分散性好，可以缩短摇瓶培养时间，最快2天即可终止摇瓶培养。如果培养基浑浊，多半是细菌污染的结果。培养液只有在通过显微镜检查后才能用于生产。摇瓶培养的液体菌种在4℃冰箱中可保存20 ~ 30天，在15 ~ 20℃室温下可保存5 ~ 7天，对接种成功率和产量无不良影响。
在生产实践中，也可以用大玻璃瓶制备液体菌种，但必须有效果更好的空气过滤装置。
2.菌丝体三级扩大培养的一级种子罐定容35升，摇瓶种子通过带阀门的接种管接种，摇瓶种子按5%-7%的比例接种1.5-2升，按发酵工艺培养成熟；一级种子接种到二级种子罐中，恒量350升，按10%接种35升一级种子，培养成熟。无论哪种菌种罐，接种前，空罐必须消毒(135 ~ 140℃)1小时，然后注入培养液灭菌。程序是先将夹层预热至90℃，10分钟后，放蒸汽进入内层升温至115℃左右，保温8分钟，时间不宜过长，以免破坏营养成分。然后向夹层内注入冷水降温至26℃后接种。接种时注意打开排气口，关闭进气口，将压力降至0.05 MPa。同时，取样进行显微镜检查，用肉汤培养基检查培养液的灭菌情况。0点取样检查杂菌，0。d值(光密度)和初始糖；12、24、36和48小时，分别取每个样品检查0。d值、残糖和pH值。正常培养48小时后，pH值降至5.0，净长为0。d值在0.5左右，耗糖量在一个单位左右，可以转移到容积较大的三级培养罐。
三级培养罐容积为10吨，一般恒定容积为7500升。同时加入培养液和消泡剂(聚氧化丙烯甘油醚)，消泡剂用量为2.5升，占培养液的0.03%。按照10%接种量接种菌种(两个二级种子罐连接1三级罐)。先倒罐(140℃)1小时，再实际倒罐(115 ~ 118℃)50 ~ 60分钟，然后降至25℃接种。前培养温度为25 ~ 26℃，后培养温度为26 ~ 27℃。pH控制在5.5左右，降低时流加尿素，用量一般为培养液的0.2%。发酵前期通气量为1∶05(体积/体积)，中期升温可将通气量提高至1∶1，防止pH下降过快。接种后，叶轮转速为180 rpm，培养72小时后，每12小时取样，测定糖、氮、pH和杂菌。中间补料可以提高菌丝生长速度，缩短发酵时间，提高细菌浓度。20小时、40小时、60小时都可以补充材料，补充材料的量视具体情况而定。
注意控制培养时间，过早放罐菌丝体产量低，过晚菌丝体会老化自溶。一般可在三级罐中培养3 ~ 4天。装罐标准:pH降至5，残糖2.5左右，氨氮不大于30mg/ml，菌球浓度达到1000 ~ 1500/ml，或3000转/离心10分钟后，每100 ml菌泥湿重为20 ~。
应根据真菌的生长要求选择不同的工艺条件。灰树花一般控制温度在25℃，罐压0.05 MPa，通气量(液体:气体)1: 0.3 ~ 0.5，搅拌转速200转/分。
检查发酵液质量的项目包括:纯度检查，显微镜或平板培养未检出细菌和霉菌；活力检查:显微镜检查可见菌球边缘菌丝分枝细密，结晶紫染色时菌丝颜色较深，菌丝原生质无凝集和液泡。培养基静置5分钟后，菌泥不沉。80%的菌球直径小于65438±0毫米。
培养液经板框过滤或连续离心得到菌丝体，干燥后可直接食用或作为饮料和食品添加剂；还可以提取灰树花的胞内多糖，将培养液浓缩得到胞外多糖，可作为制备药物的原料。
含有大量菌丝的培养液可以用来代替母种和栽培种。液体菌种扩繁的菌种具有生长快、活力强、定殖培养快、污染率低的优点。大规模培养时，可将菌丝体液体注入已灭菌的培养袋和5吨发酵罐中，3天内可生产3.5吨液体菌种。按5%的接种量，500克干料的培养袋可注入25毫升液体菌种，70吨培养料可接种3.5吨液体菌种，约1.4万个培养袋。