细菌培养怎么做?

细菌培养是一种通过人工方法使细菌生长繁殖的技术。大多数细菌可以通过人工方法培养,即接种在培养基上使其生长繁殖。培养的细菌用于研究、鉴定和应用。\x0d\具体培养步骤:\x0d\以光合细菌的培养方法为例。光合细菌培养方法依次分为容器和工具的消毒、培养基的配制、接种和培养管理四个步骤。\x0d\ (1)此处省略对容器和工具消毒的参考。\x0d\(二)培养基的制备\x0d\ 1。培养水\ x0d \如果培养的光合细菌为淡水种,可用蒸馏水培养菌种,用灭菌自来水(或井水)配制生产培养物。如果培养的光合细菌是海水种,培养基要用天然海水配制。注意,海水加磷时,不能用磷酸二氢钾,否则会产生大量沉淀。\ x0d \ 2。菌种培养灭菌消毒的培养基应与培养容器一起在高压灭菌器中灭菌。对于小规模生产性培养,配制好的培养液可用普通铝锅或大三角瓶煮沸消毒。在大规模生产性养殖中,沉淀砂过滤后的水用漂白粉(或漂白液)消毒后再使用。\ x0d \ 3。培养基配制根据栽培品种的营养需求选择合适的培养基配方。根据培养基的配方,称取所需物质,逐一溶解,混合,制成培养基。也可先制成母液,使用时按比例加入一定量。\x0d\ (3)接种应在配制好接种培养基后立即进行。生产性培养中光合细菌的量比较高,一般为20% ~ 50%,即虽然母液与新配制的培养液的量之比为1: 4 ~ 1: 1,但也不能低于20%,特别是微气培养,接种量要高一些,否则光合细菌在培养液中很难占据绝对优势,影响培养。\x0d\(四)培养管理在光合细菌的培养过程中,管理包括三个方面:日常管理、操作与检测、生长情况的观察与检查、问题的分析与处理。\x0d\日常管理和检测:\x0d\(1)搅拌和曝气:在光合细菌的培养过程中,曝气或搅拌是必不可少的,用来帮助沉淀下来的光合细菌漂浮起来,以获得光照,维持细菌细胞的良好生长。小规模厌氧培养通常采用人工摇动培养容器使细菌细胞漂浮的方法,每天至少3次,间隔一定时间。在大规模厌氧培养中,使用机械搅拌器或小型水泵使水缓慢循环,以保持细菌悬浮。微气培养是通过曝气来帮助细菌漂浮。因为培养液中溶解氧含量增加,光合细菌的增殖受到抑制,产量下降,所以必须严格控制曝气量。一般采用定期间歇曝气。曝气量控制在1 ~ 1.5l/(L·h)之间,溶解氧量保持在1×10-6以下。\x0d\(2)调节光照:培养光合细菌需要持续光照。在日常管理工作中,应根据需要经常调节照度。白天可以靠阳光培养,晚上需要人工光源照明,也可以完全靠人工光源培养。碘钨灯或白炽灯泡通常用作人工光源。不同的培养方式需要不同的光照强度。一般培养的光照强度要控制在2000-5000 LX之间。如果光合细菌生长快,细胞密度高,光照强度应提高到5000 ~ 10000 LX。可以通过调节培养容器和光源之间的距离或使用可控电源盒来调节光强。\x0d\(3)调节温度:光合细菌能适应的温度范围很广,一船在23 ~ 39℃范围内都能正常生长繁殖,无需调节温度。常温培养也可以通过调节,将温度控制在最适合光合细菌生长繁殖的范围内,让光合细菌更好的生长。\ x0d \(4)pH值的测定和调节:在培养光合细菌的过程中,一定要注意pH值的变化。由于光合细菌的增殖,菌液的pH值升高,这意味着光合细菌正处于指数生长期。然而,当pH值超过生长的最适范围甚至适应范围时,光合细菌的生长达到高峰,然后下降。如果能及时调节菌液的pH值,使pH值保持在最佳范围内,光合细菌就能继续生长繁殖。为了延长光合细菌的指数生长期,提高培养基的利用率和单位水体的产量,PH值的测定和调节非常重要。加酸是用来降低菌液的pH值。醋酸、乳酸、盐酸都可以,醋酸是最常用的一种。在日常管理中,必须每天或隔天测定菌液的pH值,当pH值上升超出最佳范围时,通过加酸进行调节。如果在培养过程中没有对pH值进行测量和调整,当光合细菌的生长达到一定密度时,pH值也会上升到9以上,细菌的生长就会受到阻碍。这时候就要收获或者扩大文化了。如果在培养过程中不调节PH值,最终产量很低。