“微生物检验”形态学检验对细菌鉴定的导航作用

细菌鉴定的原则之一是以最少的试验次数完成鉴定。细菌形态学检查是最基本、简单、快速的常规鉴定方法。细菌形态学包括细菌细胞形态学和细菌菌落形态学。细菌形态的正确描述取决于方法、培养基、培养时间、染色试剂等。不同的培养基和培养时间会影响细菌的形态。以下是我对形态学检查对细菌鉴定导航作用的认识。欢迎阅读。

1群体特征观察

细菌在固体培养基表面生长形成菌落。菌落的描述应包括菌落大小(分为大、中、小三种，以1mm为界)、形状、高度、边缘、表面状态、密度(透明度)、硬度(用接种环刮取菌落时的感觉)、内部结构、颜色、光泽、对培养基表面的粘附情况，以及菌落的溶血、臭味、产色素情况。观察菌落特征的目的是初步鉴定细菌。有些特征是某些细菌所特有的，具有属或种的鉴定价值。例如羊血琼脂平板上肺炎链球菌的脐窝菌落(如图1)、放线杆菌菌落的特殊内部结构(如图2)、侵蚀艾肯的帽子样菌落、斯氏假单胞菌的皱纹样菌落、变形杆菌的迁移性菌落、铜绿假单胞菌的水溶性色素、卟啉菌的脂溶性色素(如图3)和粘质沙雷氏菌的红色色素(如图4)。金黄色葡萄球菌产生吲哚产生的吲哚气味、嗜血杆菌产生的鼠洞气味、诺卡氏菌产生的腐土气味、厌氧菌产生的腐氨气味、荧光假单胞菌产生的黄色荧光素、部分厌氧菌产生的砖红色荧光素等。有些细菌在气体的影响下产生色素(粘质沙雷氏菌在厌氧环境下不产生颜色)，有些细菌在光的影响下产生色素(有些快速生长的分枝杆菌由亮或暗产生颜色)。

细菌菌落特征的观察和描述是细菌鉴定的第一步，其主要目的体现在以下几个方面。

1.1致病菌的定量或半定量在对标本进行定量或半定量接种后，通过菌落计数即可得出定量或半定量结果。细菌的定量分析在尿液分析和疗效动态观察中具有临床意义，半定量适用于开放标本的结果分析(确定优势菌)。

1.2更有可能确定开放的病原菌标本被炎症组织周围的皮肤和粘膜的共同菌群污染。观察培养结果时，应根据直接涂片镜检结果和菌落形态特征确定致病菌。

1.3在解读血培养镜检结果和分析阳性血培养瓶转移结果时，应结合阳性培养液直接涂片镜检结果。如果涂片结果与培养结果不一致，应考虑操作失误或污染。

1.4根据不同培养基上菌落的形态特征，结合革兰氏染色镜检和快速辅助试验(氧化酶、过氧化氢酶、凝固酶等)的结果确定鉴定方向。)，可以确定识别方向。

2细菌形态观察

革兰氏染色细胞形态学是细菌分类学的基础。临床微生物实验室仍然使用细胞形态学的方法来鉴定细菌。掌握细胞形态学的标准方法可以为准确鉴定细菌提供可靠的保证。观察和描述细菌细胞的形态特征是细菌鉴定的第二步，其主要目的体现在以下几个方面。

2.1说明培养结果，确定鉴定方向。无论是液体培养(如血液培养、标本直接增菌培养)还是固体培养(琼脂平板接种)，都要对培养物进行涂片染色，以确定培养物的性质，这样可以快速报告，为下一步的鉴定指明方向。图5显示了血培养阳性培养物涂片的革兰氏染色的显微结果。

2.2鉴别细菌的手段细菌的形态结合菌落的形态特征可以鉴别细菌。例如，通过涂片显微镜很容易区分生长在选择性巧克力平板(含万古霉素)上的草绿色溶血性菌落是乳杆菌还是肠球菌(VRE)。鲍曼不动杆菌的菌落形态与克雷伯氏菌相似，区别在于前者为革兰氏阴性球菌(接近球菌)，后者为革兰氏阴性杆菌；丹毒在血平板上的菌落形态与绿色链球菌非常相似，但在显微镜下又有很大不同。图6显示了革兰氏染色显微镜下丹毒的形态学。

2.3鉴定方向和试剂选择的依据葡萄球菌和链球菌、革兰氏阳性球菌和革兰氏阳性杆菌、革兰氏阴性球菌和革兰氏阴性杆菌的鉴定方向都不一样，鉴定试剂的选择也不一样。

2.4药敏组合的选择根据CLSI文献，每种细菌都有一定的抗菌药物组合可供选择。为了准确选择药敏组合，必须有准确的细胞形态学结果支持。

3种细菌特殊结构的观察

3.1荚膜是细胞壁外被某些细菌包裹的一层粘液。不同的细菌有不同的荚膜成分，一般由多糖、肽或蛋白质组成。荚膜作为细菌的毒力因子进行观察是必要的，但荚膜染色对临床标本分离菌株的鉴定价值不大。图7显示了大肠杆菌荚膜染色的结果。

3.2鞭毛观察细菌鞭毛对细菌鉴定有重要价值。根据鞭毛的位置和数量，细菌可分为极鞭毛、双鞭毛、更新世鞭毛、周鞭毛和侧鞭毛。鞭毛是细菌的动力器官。大多数情况下，细菌鞭毛的存在可以通过动态试验来验证，但动态试验不能代替鞭毛染色进行细菌鉴定。图8显示霍乱弧菌鞭毛染色的结果。

3.3孢子形态包括孢子形状、孢子位置和孢子囊膨大。孢子的形状可分为圆柱形、椭圆形和球形，孢子的位置可分为末端、近端、中间或近中间。根据孢子的形态，可以鉴别出芽孢杆菌和梭菌。芽染法不优于革兰氏染色法，相差显微镜观察孢子优于芽染法和革兰氏染色法。图9显示了艰难梭菌孢子的染色结果。

3.4异染颗粒主要由多聚磷酸盐组成，随菌龄延长可变大。聚磷酸盐颗粒对某些染料有特殊反应，导致与所用染料不同的颜色，因此得名异染颗粒。如果用甲苯胺蓝和亚甲基蓝染色，就不是蓝色而是紫色。棒状杆菌和一些芽孢杆菌经常含有这种异染颗粒。白喉棒状杆菌的异染颗粒位于细胞两端，故又称极体，有助于该菌的鉴定。图10显示白喉棒状杆菌异染颗粒染色的结果。

综上所述，临床微生物实验室的细菌常规鉴定离不开形态学检查。很难想象革兰氏染色和形态学检查错误会得到正确的鉴定结果。形态学检查在细菌鉴定中起着重要的作用。导航？作用，具有重要价值，临床微生物检验工作者应重视。

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