花药离体培养哪一部分发育成完整植株？

诱导培养基:ms+6-ba 1mg/l+NAA 0.1mg/l；增殖培养基:ms+6-ba 1mg/l+NAA 0.1mg/l；生根培养基:1/2 ms+IBA 0.2 mg/L

培养基处理:MS培养基含3%蔗糖，0.7%琼脂，pH5.8。培养条件:温度(25±65438±0)℃,日光照65438±04h，光照强度2000Lx。

外植体的选择和灭菌

在组织培养中，我们通常选择茎尖、芽、嫩梢、茎段等有活力的分生组织作为外植体，但要根据不同植株的特点来判断具体的部位。因为幼苗的幼嫩茎尖和叶片容易采摘和后处理，愈伤组织容易形成，所以我们在选择组培材料时，选择幼苗叶片进行组培。

以健壮、无病虫害的幼苗的叶片或嫩芽为材料。材料切割后，用自来水冲洗1 ~ 2小时，然后用饱和洗涤液浸泡5-10分钟，用无菌水冲洗10-15分钟，去除表面残留物，然后在无菌状态下用70%酒精浸泡20s，用无菌水冲洗1次，再用0。最后，用无菌水冲洗外植体4-5次，每次65，438±0-2min，用吸水纸吸干外植体表面的水分，将叶片切成5mm×5mm大小，接种在诱导培养基上，无菌条件下培养。培养温度为24℃±2℃，光照强度为1500lx，每天光照约10小时。

3.幼苗的初级培养

人们已经知道，只有在最适宜的条件下，培养的幼苗叶片才能发育得更好，发芽得更快。我知道，在培养基的最佳组成和浓度下，幼苗叶片更容易形成愈伤组织，诱导出芽；无论培养基浓度高低，都会影响幼苗愈伤组织和芽的发育，严重时甚至导致外植体死亡。

因此，根据实际情况，我们将经过消毒的叶片或腋芽接种在0.7%琼脂固化的MS培养基上，补充NAA0.1 mg/L、BA0.1 mg/L、葡萄糖或蔗糖3%，并调整3%，pH值至5.8。在25 ~ 30℃，光照强度1500 ~ 4000 LX，日光照14小时的培养室中培养。接种在诱导培养基上的外植体在大约3周内开始萌发。1个月后，叶片或腋芽外植体膨大，进而形成大量愈伤组织和芽，每个外植体平均可产生30 ~ 40个不定芽。

4.幼苗的继代培养

初代培养会产生大量的无根苗，要经常观察幼苗的生长情况。当植株满瓶时，我们需要从中下部切掉初代培养中分化出的幼苗，选择生长良好的茎尖组织进行后续培养。在这个过程中，首先要从试管中提取培养出爱情草的幼苗，用镊子除去老化的叶子和茎。将选择健壮幼苗叶再次切下，置于继代培养基中，并放回组织培养室进行进一步培养。我们选择25天为一个周期，这样反复继代培养几次就可以得到大量的幼苗。

我们总是观察到，当诱导2-3cm无菌芽生长时，将较大的丛生芽从原代培养的愈伤组织上切下，转移到继代培养基中，或将较小的丛生芽直接转移到继代培养基中。以MS基本培养基+1 ppm 6-BA为继代培养基，继代培养丛生芽。当芽长大后，转移到附加NAA0.1 mg/L和BA0.1 mg/L的MS培养基上，芽可进一步生长成苗。这样经过1个月的继代培养，丛生芽以20 ~ 30倍的速度生长，半年后可获得大量优质的组培苗。

幼苗生根培养

因为在继代培养过程中，幼苗愈伤组织只能分化出不定芽和侧芽，而不能诱导根的分化，根的形成必须在生根培养基上诱导。因此，我们应该随时观察幼苗的生长情况。当继代培养的幼苗长出3-5片小叶时，应从幼苗基部切下无根苗，注意不要损伤幼苗，将幼苗转移到无菌操作台上的生根培养基中。

在一定条件下，组培苗可直接移栽到基质中，20天左右即可长出根来。但为了获得大而健壮的组培苗，可将无根组培苗移栽到添加0.1ppmNAA的1/2 ms培养基中，两周后基部长出小根时。这样的幼苗比前者长得更好，长得更快。

6组培苗移栽前的炼苗和准备

当试管苗高2 ~ 3厘米，叶片3 ~ 5片，根系发达时，应转入驯化室，并封闭瓶口进行炼苗。在此期间，可以适当增强温室内的温度和光照。封闭7天后要打开瓶盖适应外界环境，开瓶炼苗。幼苗用开炼时，不允许一下子就开。幼苗用开放法炼苗时，第一天要开三分之一，两天后二分之一逐渐适应外界湿度。然后第六天开瓶，开瓶炼苗的时间比闭瓶的时间长。在适当降低空气湿度的条件下，在20℃左右培养1 ~ 2周。移栽前两天打开瓶盖，加少许水使琼脂软化，然后取出试管苗，洗掉试管苗基部的琼脂，避免滋生杂菌，引起根腐病。

移植的试管苗喜欢肥沃疏松的基质。选择的基质配方为泥炭、蘑菇泥、木糠比例为2:1:1，可适当添加珍珠岩。移栽前，将基质在高压灭菌器中灭菌65438±05分钟，选择一个长、宽、高为48×30×5cm的种植盘，将基质铺在其中，浇水，放置一段时间，即可在其中种植组培苗。

7.炼苗后移栽

移栽苗的温度应保持在18℃ ~ 25℃，相对气温在80%左右。移栽苗成活率可达90%以上。移栽初期不需要给幼苗施肥，每3-5天喷一次水。移栽20天后，幼苗开始快速生长，此时每周浇一次营养液。当幼苗长到挤在栽盘中，就可以栽到盆里了，基质还是选的。为了更好地固定根系，在基质中掺入一定比例的河沙。所选花盆的直径为6厘米。当幼苗长大，根部长满花盆时，更换直径为10cm的花盆，更有利于幼苗的生长和早期开花。

8摘要

苗木是世界上流行的室内盆栽花卉。通常采用种子和带叶柄的叶片进行繁殖，不仅导致性状分离、幼苗退化、繁殖系数低，而且需要较长时间才能培育出大量整齐一致的幼苗。种苗的组织培养方便经济，短时间内即可获得成功的试管苗。本研究探讨了利用组织培养技术快速繁殖种苗的可行方案，为扩大种苗繁殖和在短时间内获得大量优良组培苗提供了科学依据。种苗组织培养技术有无限的发展机会。合理利用不仅可以促进区域经济社会发展，还可以推动我国花卉产业的跨越式发展。我们探索的培养条件为今后组培苗的工业化生产奠定了基础。